Lääketieteen tohtori Wolfgang Lutz ja fil.tri Christian Allan suosittavat elämää ilman leipää. Suomalaista ruisleipäaddiktia ajatus saattaa kauhistuttaa. Tohtorit kuitenkin tuntevat asian, josta kirjoittavat. Yli neljänkymmenen vuoden ajan Itävallassa ja Saksassa lääkärinä toimiessaan tohtori Lutz hoiti tuhansia potilaita vähähiilihydraattisella ruokavaliolla. Hänen potilasarkistojensa tiedot todistavat ihmiselle optimaalisen ruokavalioon kuuluvan runsaasti eläinperäistä proteiinia ja rasvaa, mutta vain vähän hiilihydraatteja, ja sekin vähä tulee kasviksista ja marjoista eikä suinkaan viljoista ja perunasta. Lutz tähdentää, että hiilihydraattien käyttö ravinnoksi vaikuttaa suoraan hormoneiden eritykseen ja näin aiheuttaa ongelmia sisäerityksessä. Seurauksena on aineenvaihdunta- ja rappeumasairauksia, liikalihavuutta, diabetesta, sydänsairauksia ja syöpää. Lutz selostaa yksityiskohtaisesti hormoneiden, kuten insuliinin ja kasvuhormonin, vaikutuksia ylipainon kertymiseen ja erityisesti tyypin 2 diabeteksen kehittymiseen. Tohtori Lutz sanoo suoraan: tyypin 2 diabetes on seuraus liioista hiilihydraateista. Hän kysyy, miten on mahdollista, että lääkäri kertoo diabeetikolla olevan liian paljon sokeria veressään, mutta kehottaa olemaan huolehtimatta ruoan hiilihydraattien määrästä. Lutz toteaa, että tällainen on sekä ennenkuulumatonta että vaarallista potilaalle. Lutzin neuvo diabeetikoille on vähentää hiilihydraatteja, lisätä rasvoja ja proteiineja sekä olla kärsivällinen: keho tarvitsee aikaa toipuakseen sairaudesta, joka on kehittynyt vuosia. Wolfgang Lutz oli yleislääkärin poika, joka varttui Itävallan maaseudulla ja opiskeli lääketiedettä Innsbruckin ja Wienin yliopistoissa. Lääkäriksi valmistuttuaan Lutz jatkoi Wienin toisen yliopiston lääketieteellisellä klinikalla tutkimuksiaan, mutta toinen maailmansota keskeytti hänen tutkimustyönsä. Sen jälkeen hän keskittyi ilmailun lääketieteellisiin näkökohtiin. Pieneläinten kanssa työskennellessä Lutz oivalsi kehittää lentäjille puvun, joka täyttyi automaattisesti sillä hetkellä, kun hapenpaine putosi kriittisesti lentokoneessa. Wolfgang Lutz ei tohtinut suorittaa kokeita ihmisillä. Lutzin toinen keksintö liittyi elvytystekniikkaan; hän havaitsi, että aivot heräävät aikaisemmin kuin sydän. Se sai hänet kehittämään elvytystekniikan, joka auttoi pelastamaan arktisten vesien jäätymisestä pelastuneiden lentäjien hengen. Lutz toivoi myös, että hänen tekniikkansa voisi auttaa sydänleikkauksissa. Toisen maailmansodan jälkeen Wolfgang Lutzia houkuteltiin töihin avaruusteknologian pariin Yhdysvaltoihin, mutta tämän työtarjouksen Wolfgang Lutz hylkäsi. Lutz osallistui Nürnbergin oikeudenkäynteihin todistajana. Vuonna 1947 Wolfgang Lutz aloitti jälleen lääkärin tehtävissä. Salzburgissa Wolfgang Lutz aloitti yksityisellä klinikalla vastaanoton vuonna 1968. Tästä toimesta hän jäi virallisesti eläkkeelle vuonna 1992. Wolfgang Lutzia kuvailtiin hurmaavaksi, huumorintajuiseksi ja rohkeaksi mieheksi, jolla oli aina aikaa potilaillensa. Wolfgang Lutz kuoli 97-vuotiaana. Hän suoritti valtaisan tehtävän tutkimalla ravinnon ja terveyden välistä yhteyttä. Lutz oli huolissaan ”sivilisaation sairauksiksi” kutsumiensa ilmiöiden dramaattisesta kasvusta. Wolfgang Lutz kehitti ajatuksen siitä, että ihmiset eivät ole sopeutuneet tarpeeksi äskettäin neoliittisen aikakauden korkeahiilihydraattisiin ruokiin. Lutz ehdotti, että koostumukseltaan samanlainen ruokavalio, kuin jääkauden metsästäjä-keräilijän ruokavalio voisi olla sopivampi genomiimme. Tohtori Wolfgang Lutz suositteli ”modernia paleoliittista ruokavaliota”, joka ei sisällä rajoituksia proteiinin ja rasvan suhteen, mutta silti se sisälsi tarpeeksi vähän hiilihydraattia ollakseen yhteensopiva geneettisen perintömme kanssa. Wolfgang Lutz päätteli lisäksi, että hormonierittymisemme malli on säädettävä tuon kaukaisen aikakauden suurelta osin eläinten ruokavalioon. Lutz osoitti kliinisesti, kuinka nykypäivän vertaileva hiilihydraattien ylikuormitus vaatii kompensoivia säätöjä hormonaalisissa eritteissämme – ensisijaisesti insuliinissa, mutta myös kilpirauhasen, lisämunuaisen, kasvun ja sukupuolihormonien tasolla. Wolfgang Lutz kuvaili ensimmäisenä lääkärinä, kuinka nämä usein pitkittyneet hormonaalisen säätelyn häiriöt voivat olla monien nykyaikaisten sairauksien taustalla. Itävallassa ja Saksassa yli neljänkymmenen vuoden ajan lääkärinä toimiessaan tohtori Wolfgang Lutz hoiti tuhansia potilaita vähähiilihydraattisella ruokavaliolla. Löydöistään tohtori Wolfgang Lutz kirjoitti mielellään kirjoissaan ja lisäksi hän kirjoitti yli 60 tieteellistä artikkelia. Vuodelta 1967 on hänen kirjansa Leben Ohne Brotin, josta on jo ainakin 16. painos menossa. Tämä kirja käännettiin vuonna 1986 nimellä: Dismantling a Myth: The Role of Fat and Carbohydrates in Our Diet. Yhdessä Christian Allanin kanssa Wolfgang Lutz kirjoitti vuonna 2000 kirjan, Life Without Bread, joka julkaistiin Yhdysvalloissa.

 

Voiko klooridioksidi estää koronaviruksen tai muiden virusinfektioiden leviämistä? Lääketieteelliset hypoteesit

Johdanto

Motivaatio

Virukset ovat aiheuttaneet monia epidemioita ihmiskunnan historian aikana. Uusi koronavirus [10] on vain viimeisin esimerkki. Uusi virusepidemia voi olla arvaamaton, ja erityisten puolustusvälineiden ja vastatoimien kehittäminen uutta virusta vastaan vie aikaa jopa nykyajan modernin lääketieteen ja teknologian aikakaudella. Tehokkaan ja spesifisen lääkityksen tai rokotuksen puuttuessa olisi toivottavaa saada ei-spesifinen protokolla tai aine viruksen inaktiiviseksi eli passiiviseksi tekemiseksi, aine/protokolla, jota voitaisiin soveltaa aina kun uusi virusepidemia ilmenee. Tämä on erityisen tärkeää tapauksissa, joissa esiin tuleva uusi virus on yhtä tarttuva kuin SARS-CoV-2 [4].

Tämän tiedonannon tarkoitus ja rakenne

Tämän kirjoituksen aiheena on ehdottaa mahdollisuutta kehittää ja ottaa käyttöön antiviraalisia protokollia käyttämällä erittäin puhtaita klooridioksidin (ClO2) vesiliuoksia. Tämän ehdotuksen tavoitteena on käynnistää tutkimus, joka voisi johtaa käytännöllisten ja tehokkaiden virustentorjuntakäytäntöjen käyttöönottoon. Tätä tarkoitusta varten käsittelemme ensin joitakin tärkeitä ClO2-molekyylin ominaisuuksia, jotka tekevät siitä edullisen viruksentorjunta-aineen, ja sitten tarkastellaan joitain aikaisempia tuloksia ClO2-kaasun käytöstä viruksia vastaan. Lopuksi oletamme menetelmistä virusinfektioiden leviämisen hillitsemiseksi käyttämällä vesipitoisia ClO2-liuoksia.

Aikaisempi kokemus ja tausta ClO2 :n käytöstä viruslääkeaineena

Virusten inaktivointi ClO2:lla vesifaasissa

Nykyisen tietämyksemme mukaan ClO2:n vesiliuos pystyy inaktivoimaan kaikentyyppisiä viruksia. Desinfiointiaineita (vesifaasissa) verrataan niiden CT-arvoilla, jotka ovat pitoisuus (mitattu mg/l) kerrottuna kosketusajalla (mitattu minuutteina). CT-taulukoissa ClO2 on osoitettu viruksille yleisesti, poikkeuksia mainitsematta. Esimerkiksi [6]:n mukaan CT-arvoa 8,4 mg × min/L tarvitaan neljän suuruusluokan ("4 log" tai "99,99%)" virusten inaktivoimiseksi vesipitoisessa väliaineessa klo. 25 °C.

Viruksen inaktivoinnin kemiallinen mekanismi: ClO2:n reaktio aminohappotähteiden kanssa

Vuonna 1986 Noss et ai. [19] osoittivat, että bakteeriviruksen f2 inaktivaatio ClO2:lla johtui sen reaktioista viruksen kapsidiproteiinien kanssa, eikä tarttuvan viruksen RNA:n inaktivaatiota tapahtunut lähes ollenkaan [8], kun sitä käsiteltiin ClO2:lla erikseen. He havaitsivat kuitenkin [19], että kolme erillistä kemiallista osaa virusproteiinissa, nimittäin kysteiini-, tyrosiini- ja tryptofaaniaminohappojäännökset, pystyivät reagoimaan nopeasti ClO2:n kanssa. Vuonna 1987 Tan et ai. [28] testasivat ClO2: n reaktiivisuutta 21 vapaalla aminohapolla. ClO2 reagoi vain kuuden aminohapon kanssa liuotettuna 0,1 M natriumfosfaattipuskuriin, pH 6,0. Reaktio kysteiinin, tryptofaanin ja tyrosiinin kanssa oli liian nopea seuratakseen niiden tekniikkaa. Kolme muuta aminohappoa (histidiini, hydroksiproliini ja proliini) reagoivat ClO2:n kanssa paljon hitaammin, mitattavissa olevalla nopeudella.

Kolmen nopeasti reagoivan aminohapon (kysteiini [12], tyrosiini [17] ja tryptofaani [27]) reaktiivisuutta tutkittiin Margerumin laboratoriossa vuosina 2005-2008. He havaitsivat, että kysteiinillä oli suurin reaktiivisuus näistä aminohapoista. Kokeellisista tiedoistaan he laskivat toisen kertaluvun nopeusvakiot (pH:ssa 7,0, 25 °C:ssa ja 1 M ionivahvuudessa) ja saivat seuraavan sekvenssin: kysteiini 6,9 × 106 M-1 s -1 >> tyrosiini 1,3 × 105 M −1s −1 > tryptofaani 3,4 × 104 M−1s−1 >> guanosiini-5′-monofosfaatti 4,5 × 102M -1s-1. (He tutkivat guanosiini-5'-monofosfaattia [18] malliyhdisteenä guaniinille nukleiinihapoissa. Tässä esitetyt tiedot on otettu viitteen [18] taulukosta 3).

Vuonna 2007 Ogata [22 ] havaitsi, että ClO2:n antimikrobinen vaikutus perustuu tiettyjen proteiinien denaturoitumiseen, mikä johtuu ensisijaisesti kahden malliproteiinin (naudan seerumin albumiini ja glukoosi-6) tryptofaani- ja tyrosiinitähteiden oksidatiivisesta modifikaatiosta. -fosfaattidehydrogenaasi), jota hän käytti kokeissaan. Vuonna 2012 Ogata osoitti jälleen [23], että influenssaviruksen inaktivoituminen ClO2:lla johtui tryptofaanijäännöksen (W153) hapettumisesta hemagglutiniinissa (viruksen piikkiproteiini), mikä menetti sen reseptoreihin sitoutumiskyvyn.

Tässä yhteydessä on mielenkiintoista huomata, että uuden koronaviruksen SARS-CoV-2 piikkiproteiini sisältää 54 tyrosiinia, 12 tryptofaania ja 40 kysteiinitähdettä [29]. Jos oletetaan, että vesiliuoksessa kaikki nämä jäännökset pystyvät reagoimaan ClO2:n kanssa aivan kuten vapaat aminohapot, niin virusten inaktivoituminen voi olla erittäin nopeaa jopa erittäin laimeassa (esim. 0,1 mg/l:ssa). ) ClO2-liuos.

ClO2 on vesiliukoinen kaasu

Vaikka klooridioksidi itsessään on kaasu, se liukenee hyvin veteen. Kun läsnä on sekä ilmaa että vettä, ClO2 jakautuu kahden faasin välillä lämpötilan määräämässä tasapainosuhteessa. Tämän ClO2:n jakautumiskertoimen määritti Ishi [11] vuonna 1958. Jakautumiskerroin γ = [ClO2] G/[ClO2] L antaa samoissa yksiköissä ilmaistujen pitoisuuksien suhteen kaasussa ja vesipitoisessa liuoksessa vaiheet (esim. g/L) ja muutokset lämpötilan funktiona. Esimerkiksi 20 °C:ssa γ = 0,0316, mikä osoittaa, että tasapainotilassa 1 cm 3 vesifaasi sisältää (0,0316) -1= 31,6 kertaa enemmän ClO2-molekyylejä kuin 1 cm 3 kaasufaasi.

Käytännössä kahden faasin pitoisuudet ilmoitetaan yleensä ppm:inä. Nämä dimensiottomat luvut määritellään kuitenkin eri tavalla kaasu- ja nestefaasissa ppm (V/V) ja ppm (m/m), vastaavasti. Siksi käytännön syistä tarvitsemme jakautumiskertoimen, joka antaa näiden pitoisuuksien välisen suhteen. Yksinkertainen laskelma antaa tulokseksi, että jakautumiskerroin ppm:nä on 357 kertaa jakautumiskerroin (g/L), joten 20 °C:ssa γ ppm = 11,3. Siten seuraavaa kaavaa voidaan käyttää laskemaan kaasufaasin ClO2 -pitoisuus, joka on tasapainossa ClO2-liuoksen kanssa 20 °C:ssa:

[ClO2]kaasuasisäänppm(V/V)=11.3×[ClO2]aqsisäänppm(m/m)

Virusten inaktivointi ClO2:lla kaasufaasissa

Viruksen inaktivointireaktiot (Cl02:n reaktiot kolmen aminohapon kanssa) tapahtuvat vesipitoisessa väliaineessa; näin ollen ClO2 voi inaktivoida mikrobeja vain niiden märässä tilassa. Siksi kostutettu ClO2-kaasu voi olla ihanteellinen aine viruksia vastaan sekä niiden märässä että kuivassa tilassa. Vesipisaroiden kuljettamat virukset voivat helposti inaktivoitua jopa ClO2 -kaasulla, koska ClO2 liukenee hyvin veteen [11]. Kuiva ClO2-kaasu olisi epäsopiva, koska vesipisaran vesipitoisuus voisi haihtua ja vesipitoisen väliaineen puuttuessa ClO2:n reaktiot hidastuvat erittäin paljon. Todellakin, Morino et ai. [16] raportoi, että käytettäessä alhaista ClO2-pitoisuutta kaasufaasissa FCV:tä vastaan kuivassa tilassa, ilmakehän kosteus – vähintään 75–85 % suhteellinen kosteus – on välttämätön virusten inaktivoimiseksi. Kostutetun ClO2-kaasun käytön etuna on, että sen vesipitoisuus pystyy kostuttamaan viruksia myös kuivassa ympäristössä. Suurin osa viruksista löytyy kovilla pinnoilla sisätiloissa, mutta pieni osa viruksista on ”ilmassa”, kiinnittyneenä pölyhiukkasiin, jotka voivat kuljettaa mukanaan myös yksittäisen mikrobin tai mikrobiaggregaatin. Siksi tehokkaan desinfioinnin edellytyksenä on, että kaikki mikrobit kaikissa huoneen osissa ovat märkiä ja joutuvat kosketuksiin ClO2:n kanssa . Jos vesipitoista ClO2:ta on tarpeeksi liuosta suihkutetaan huoneeseen, pisarat kyllästävät ilmakehän vesihöyryllä kaikkialla, lisäksi ilmakehä sisältää kaikkialla myös kaasumaista ClO2:ta . Tämän menetelmän suuri etu on, että kaasufaasin H2O- ja ClO2 -molekyylit pääsevät mikrobien jokaiseen pieneen huoneen nurkkaan. Hienojakoiset vesipisarat, jotka sisältävät liuennutta ClO2:ta, voivat luoda edullisen ympäristön tällaisten olosuhteiden ylläpitämiseksi pidempään.

Tämä korkeaa ClO2-pitoisuutta käyttävä menetelmä mahdollistaa huoneiden nopean desinfioinnin, kun ihmisiä ei ole paikalla, esim. teho-osastoilla, karanteenina käytettävissä rakennuksissa tai julkisissa kulkuneuvoissa. ClO2-kaasun käyttö on kuitenkin rajoitettua, kun läsnä on ihmisiä, koska se on haitallista ihmisille ja eläimille tiettyjen pitoisuuksien ylittyessä. Yhdysvaltain työturvallisuus- ja työterveyshallinto (OSHA) rajoittaa työpaikan ilmassa sallitun ClO2-kaasupitoisuuden arvoon 0,1 ppm (V/V) aikapainotettuun keskiarvoon (TWA) 8 tunnin altistuksessa ja tilapäisesti korkeampaan 0,3 ppm:ään. Lyhytaikaisen altistuksen raja (STEL) vain 15 minuutin ajan [30].

Aikaisempi tutkimus virusinfektioiden ehkäisystä kaasumaisella ClO2 :lla

Ogata [21] tajusi ensin, että ClO2 pystyy inaktivoimaan viruksia jopa alle 0,1 ppm (OSHA TWA) -rajan, joka on ihmiselle haitattomissa pitoisuuksissa. Vuonna 2008 Ogata ja Shibata [25] osoittivat, että hiirten influenssa A-viruksen tartuttaminen aerosolissa voidaan estää ClO2-kaasulla , jota on ilmassa pitoisuutena 0,03 ppm, mikä on vain 30 % sallitusta TWA-altistustasosta. ihmisiä työpaikalla. He päättelivät, että "ClO2-kaasu voisi siksi olla hyödyllinen ehkäisevänä välineenä influenssaa vastaan ihmistoiminnan paikoissa ilman evakuointia."He ovat jopa yrittäneet vähentää flunssatartuntojen ilmaantuvuutta koululaisten keskuudessa käyttämällä alhaisia pitoisuuksia ClO2-kaasua luokkahuoneessa [24].

Näistä lupaavista varhaisista tuloksista huolimatta emme ole tietoisia tämän menetelmän laajemmasta soveltamisesta viimeisen vuosikymmenen aikana. On olemassa kaksi ongelmaa, jotka voivat haitata tämän menetelmän laajaa käyttöönottoa:

1. Edellä mainittujen kirjoittajien käyttämällä tekniikalla ei ole helppo tehtävä saavuttaa ja ylläpitää erittäin alhaista ClO2-pitoisuutta suuressa tilassa ja pitkään, mikä on edellytys tyydyttävän viruksen inaktivaatiotason saavuttamiselle.

2. Ei ymmärretä, miksi alhaiset ClO2-tasot eivät ole haitallisia ihmisille tai eläimille ja silti ovat tehokkaita viruksia vastaan.

ClO2:n kokoselektiivinen vaikutus

Vaikka kysteiini-, tyrosiini- ja tryptofaanijäännöksiä voidaan löytää myös ihmisen kudoksista, ClO2 on paljon vähemmän myrkyllistä ihmisille tai eläimille kuin mikrobeille (bakteerit, sienet ja virukset). Noszticzius et ai. [20] havaitsivat, että tärkein syy tähän ihmisten ja mikrobien väliseen selektiivisyyteen ei perustu niiden erilaiseen biokemiaan vaan eri kokoon. Kokeisiin ja laskelmiin perustuen ja reaktiodiffuusiomallia käyttäen Noszticzius et al. [20] havaitsivat, että elävän organismin tappamisaika on verrannollinen sen ominaiskokoon (esim. halkaisijan) neliöön, joten pienet organismit kuolevat erittäin nopeasti. Heidän laskelmansa osoittivat, että bakteeri, jonka halkaisija on 1 µm, kuolisi 300 mg/l CiO2 liuoksessa 3 ms:ssa, ja jopa paljon laimeammassa, 0,25 mg/l CiO2-liuoksessa se eliminoituisi vain 3,6 sekunnissa. Tänä aikana CiO2 saavuttaa kaikki solun osat ja tappaa sen tuhoamalla sen kysteiiniä, tyrosiinia ja tryptofaania sisältävät proteiinit, jotka ovat välttämättömiä elämänprosessille.

Glutationin suojaava rooli ClO2:n hapettumista vastaan elävässä solussa

Ison et al.[12] Glutationi reagoi ClO2:n kanssa nopeudella, joka on jopa nopeampi kuin erittäin nopea ClO2-kysteiinireaktio. Kun ClO2 joutuu kosketuksiin elävän glutationia sisältävän solun kanssa, ClO2-pitoisuus pysyy aluksi hyvin alhaisena jopa solun sisäänmenokohdassa tämän nopean reaktion vuoksi. Pienenä molekyylinä glutationi voi myös diffundoitua nopeasti sisääntulokohtaan solun muista osista kuluttaen suurimman osan siellä olevasta ClO2:sta ja estää sitä pääsemästä proteiinien kysteiini-, tyrosiini- ja tryptofaanitähteisiin suurimmassa osassa soluista. Sytoplasma. Näin ollen alkuperäinen alhainen ClO2keskittyminen ei voi aiheuttaa liikaa haittaa. Jatkuva ClO2:n sisäänpääsy voi kuitenkin lopulta kuluttaa solun glutationi- (ja muiden antioksidanttien) kapasiteetin, vaikka solu tuottaa tällaisia antioksidantteja jatkuvasti. Tässä vaiheessa ClO2 voi päästä solun aiemmin suojatuille vyöhykkeille ja reagoida reaktiivisten aminohappotähteiden kanssa aiheuttaen vaurioituneiden proteiinien denaturoitumista ja lopulta solukuolemaa.

Glutationin ja muiden elävissä soluissa olevien pienten antioksidanttimolekyylien vaikutusta ei otettu huomioon Noszticziuksen et al. teoreettisissa laskelmissa.[20]. Heidän kokeensa tehtiin elottomalla ja pestyllä eläinkalvolla, jossa kalvoon kiinnitetyt reaktiiviset proteiinit olivat läsnä, mutta glutationi ja muut pienet molekyylit puuttuivat. Elävä solu kuitenkin tuottaa jatkuvasti näitä antioksidantteja, joten niiden roolia ei voida jättää huomiotta. Todellakin, kun tarkastellaan 0,25 mg/l ClO2-liuoksen kokeellisesti mitattua desinfiointidynamiikkaa Escherichia coli -bakteereja vastaan [2] näemme desinfiointinopeuden, joka on yllättävän nopea, mutta silti noin yhden suuruusluokan teoreettista arviota hitaampi. On järkevää olettaa, että näiden pienten pelkistävien molekyylien viivästysvaikutus on vastuussa tästä poikkeamasta.

Ihmiskudosten suojaaminen ClO2:n oksidatiiviselta vaikutukselta

Ihmissolut sisältävät myös glutationia mM pitoisuuksina sekä muita antioksidantteja, kuten C- ja E-vitamiinia, jotka toimivat yhdessä glutationin kanssa vähentäen ClO2:ta [7]. Koska ihmissolu on paljon suurempi kuin bakteeri, sen glutationivarasto ja glutationin tuotantopotentiaali ovat myös suuremmat, joten jopa eristetty ihmissolu voi selviytyä paljon pidempään ClO2-ympäristössä kuin planktoninen bakteeri. Kun otetaan huomioon, että ihmissolut eivät ole eristettyjä, vaan muodostavat kudoksia, niiden glutationivarasto voi olla monta suuruusluokkaa suurempi kuin planktonbakteerin. Lisäksi monisoluisissa organismeissa verenkierto kuljettaa antioksidantteja jatkuvasti ClO2:n vaikutuksen alaisen kudoksen soluihin, hyökäten ja auttaen niitä selviytymään. Tämä vahvistaa kokoselektiivisyysvaikutusta ja selittää yllättävän havainnon [15], että ClO2-liuoksia, jotka pystyvät tappamaan planktonbakteerit sekunnin murto-osassa, voidaan kuluttaa, koska niitä on ihmiselle turvallista juoda pieninä määrinä ( esim. 1 litran 24 mg/l ClO2-liuosta juominen kahdessa annoksessa yhtenä päivänä ei aiheuttanut havaittavia vaikutuksia ihmisillä [15]).

ClO2:n vaikutus keuhkoihin

Vaikka ihmisen kudokset eivät yleensä ole kovin herkkiä ClO2:lle, keuhkoja tulisi tarkastella eri tavalla. Tämä johtuu siitä, että alveolaarinen väliseinä, joka erottaa keuhkorakkuloiden ilmatilan kapillaarin luumenin verenkierrosta, on hyvin ohut. Diffuusioeste ihmisen keuhkoissa on vain 2 μm paksu [1], jotta hapen ja hiilidioksidin diffuusionestettä voidaan helpottaa ilman ja veren välillä. Alveoli on peitetty ohuella vuorauksen nestekerroksella, jota kutsutaan epiteelikeuhkojen limakalvon nesteeksi (ELF) tai hypofaasiksi. ELF on vain 0,2 μm paksu rotan alveoleissa [1, 13]. Se sisältää glutationia [3] ja muita antioksidantteja, kuten askorbiini- ja virtsahappoa [5 ]. On huomionarvoista, että askorbiinihappopitoisuus on 2,5-kertainen ja glutationipitoisuus yli 100 kertaa korkeampi ELF:ssä kuin plasmassa. Näiden ei-entsymaattisten antioksidanttien normaali tehtävä ELF:ssä on suojata epiteelisoluja reaktiivisilta happilajeilta (ROS), kuten superoksidiradikaaleilta tai vetyperoksidilta, jotka ovat myrkyllisiä aineenvaihdunnan tuotteita. Ne voivat myös suojata keuhkoja muilta myrkyllisiltä kaasuilta, kuten otsonilta (O3), typpidioksidilta (NO2) tai ClO2:lta . Suuret määrät ClO2: ta voivat kuitenkin kuluttaa kaikki ELF:n pelkistimet, jolloin ClO2alkaa reagoida epiteelisolujen kanssa aiheuttaen jatkuvasti kasvavaa vauriota näille soluille. Tiedetään, että korkeammat ClO2-kaasupitoisuudet voivat olla tappavia. On kuitenkin perusteltua olettaa, että ClO2:n vaikutus keuhkoihin ei riipu pelkästään sen pitoisuudesta kaasufaasissa, vaan myös kosketusajasta. Näin ollen, kun tarkastellaan ClO2:n vaikutusta keuhkoihin, olisi loogista tarkastella CT (pitoisuus) × (kosketusaika) -tuotetta samalla tavalla kuin mikrobien tapauksessa.

Virusten inaktivaatioajan arvioiminen

Virusten tapauksessa inaktivaatiomekanismi eroaa bakteerien tai muiden solujen mekanismista. On mahdollista olettaa, että viruksen inaktivaatioaika on todennäköisesti paljon lyhyempi kuin bakteerin inaktivaatioaika samoissa olosuhteissa (ClO2-pitoisuus, lämpötila jne.). Seuraavat argumentit tukevat tätä oletusta: 1. Virukset ovat noin yhden suurusluokan pienempiä kuin bakteerit, esim. SARS-CoV-2:n halkaisija on noin 120 nm [9]. [20]:ssa esitellyn viruksen tappamisaika oli 1-2 suuruusluokkaa lyhyempi kuin bakteerilla, eli diffuusio-ohjattu reaktio ClO2:n kanssa tapahtuisi lyhyemmässä mittakaavassa koko viruksen tilavuudessa.

2. ClO2-kaasun ei tarvitse tunkeutua virukseen inaktivoidakseen sen. Riittää, jos ClO2 reagoi yhden tai joidenkin piikin kysteiini-, tyrosiini- ja tryptofaaniaminohappotähteiden kanssa, jotka sijaitsevat viruksen pinnalla. Tämä tarkoittaa, että referenssin teoreettinen lähestymistapa [20] yliarvioi virusten inaktivaatioajan. Toisaalta, koska diffuusio on äärimmäisen nopeaa 0,1 µm:n pituusasteikolla, joten se ei todennäköisesti rajoita reaktioiden nopeutta. Toisaalta ClO2 voi saavuttaa suuren osan piikin reaktiivisista aminohappotähteistä tunkeutumatta viruksen proteiinikuoren läpi.

3. Virukset eivät sisällä suojaavia pienimolekyylisiä tioleja, kuten glutationia tai muita pienimolekyylisiä suojaavia aineenvaihduntatuotteita, koska viruksilla ei ole aineenvaihduntaa. Tässä suhteessa virusten pitäisi olla paljon alttiimpia kuin bakteerit Cl=2-hyökkäykselle.

Kaikki nämä tosiasiat viittaavat siihen, että kun ClO2 joutuu kosketuksiin viruksen pinnan kanssa, sen inaktivoituminen on nopeaa. Virus, joka on valmis infektoimaan solun, on kuitenkin tyypillisesti vesifaasissa, esim. nestepisarassa tai limakalvoja peittävässä epiteelin kalvossa. Näiden vesifaasien koko on paljon suurempi kuin viruksen koko. Siksi tällaisissa tapauksissa nopeutta rajoittava vaihe on todennäköisesti ClO2:n diffuusio veteen ja reaktio muiden aineiden kanssa. Itse viruksen inaktivoimiseen tarvittava aika olisi lyhyt verrattuna aikaan, joka tarvitaan riittävän ClO2-molekyylien kuljettamiseen virukseen.

Ehdotuksia virusinfektioiden leviämisen estämiseksi ClO2 :lla

Aiempien väitteiden perusteella nyt esitetään joitakin ehdotuksia siitä, kuinka vesipitoisia ClO2-liuoksia voitaisiin soveltaa globaaleihin ja paikallisiin (henkilökohtaisiin) desinfiointitarkoituksiin. Monet näistä ehdotuksista perustuvat hypoteeseihin, ja siksi niitä voidaan soveltaa vasta huolellisen tutkimuksen jälkeen. Tämän työn tavoitteena on käynnistää tutkimus näiden hypoteesien ja ehdotusten tarkistamiseksi kokeellisesti, mikä voisi johtaa uusiin erittäin puhtaiden ClO2-liuosten sovelluksiin virus- tai muita infektioita vastaan. Nämä ideat saattavat kypsyä edelleen ajan myötä, mutta globaalin pandemian uhan vuoksi olemme päättäneet edetä nopeasti.

Globaali ehkäisy

Ilmatilojen, kovien pintojen ja ihmisten desinfiointi samanaikaisesti vesipitoisilla ClO2-liuoksilla. Ehdotamme tässä pohjimmiltaan samaa ajatusta, jota Ogata et al. ovat jo ehdottaneet. [21, 24, 25]: on mahdollista luoda ClO2-ilmakehää, joka voi olla ihmiselle turvallista, mutta samalla haitallista mikrobeille. Heidän ehdotustensa ja meidän ehdotustensa välillä on kuitenkin eroja. Ogatan ryhmä piti ilmakehän ClO2-pitoisuutta (C) ainoana tärkeänä hoidon parametrina. He ehdottivat, että ClO2-konsentraatiota käytettäisiin alle 0,1 ppm (V/V) OSHA-rajan ajaksi, joka on tarpeen mikrobien inaktivoimiseksi. Tällaisella menetelmällä tarvittava kosketusaika (T) voi kuitenkin olla hyvin pitkä. Tässä suosittelemme käyttämään CT-tuotetta desinfiointiparametrina. Tällä tavalla on mahdollista levittää ClO:ta2 pitoisuutta yli OSHA-rajan, mutta vain rajoitetun ajan. Tämän menetelmän etuna on, että kun käytetään korkeampia C-arvoja, tarvittavat kosketusajat voivat olla paljon lyhyempiä. Ideaa havainnollistaa alla oleva numeerinen esimerkki.

Toinen tärkeä ero on, että Ogatan menetelmä keskittyy enimmäkseen ClO2 -kaasun rooliin, kun taas korostamme ClO2- ja H2O -kaasujen samanaikaisen käytön tärkeyttä, kuten Morino et al.:n havainnot vahvistavat. [16]. Tätä tarkoitusta varten ehdotamme uutta tapaa luoda ClO2-ilmakehä: levittää vesipitoisia ClO2-liuoksia, jotka voivat saada aikaan ClO2- ja H2O -tasapainopitoisuudet ilmakehässä, kun niitä suihkutetaan ilmaan. Vesiliuoksia on myös helpompi käsitellä kuin ylläpitää vakaita ja erittäin alhaisia ClO2-tasoja jatkuvissa kaasuvirroissa.

On suositeltavaa käyttää erittäin puhtaita ClO2-liuoksia ruiskutukseen, jotta vältetään ei-toivotut sivuvaikutukset henkilöille tai käsitellyille pinnoille. Erittäin puhtaat ClO2-liuokset haihtuvat ilman jäämiä tai jälkiä.

Havainnollistava numeerinen esimerkki

Oletetaan, että halutaan desinfioida suljettu tila ruiskuttamalla siihen ClO2-varastoliuosta. ClO2-tasapainopitoisuus c ilmassa kaasussa ja c w,e nestefaasissa voidaan laskea Ishin mittaamasta höyry-neste-tasapainojakaumasta [11]:

1. Virukset ovat noin yhden suurusluokan pienempiä kuin bakteerit, esim. SARS-CoV-2:n halkaisija on noin 120 nm [9]. [20]:ssa esitellyn viruksen tappamisaika oli 1-2 suuruusluokkaa lyhyempi kuin bakteerilla, eli diffuusio-ohjattu reaktio ClO2:n kanssa tapahtuisi lyhyemmässä mittakaavassa koko viruksen tilavuudessa.

2. ClO2-kaasun ei tarvitse tunkeutua virukseen inaktivoidakseen sen. Riittää, jos ClO2 reagoi yhden tai joidenkin piikin kysteiini-, tyrosiini- ja tryptofaaniaminohappotähteiden kanssa, jotka sijaitsevat viruksen pinnalla. Tämä tarkoittaa, että referenssin teoreettinen lähestymistapa [20] yliarvioi virusten inaktivaatioajan. Toisaalta, koska diffuusio on äärimmäisen nopeaa 0,1 µm:n pituusasteikolla, joten se ei todennäköisesti rajoita reaktioiden nopeutta. Toisaalta ClO2 voi saavuttaa suuren osan piikin reaktiivisista aminohappotähteistä tunkeutumatta viruksen proteiinikuoren läpi.

3. Virukset eivät sisällä suojaavia pienimolekyylisiä tioleja, kuten glutationia tai muita pienimolekyylisiä suojaavia aineenvaihduntatuotteita, koska viruksilla ei ole aineenvaihduntaa. Tässä suhteessa virusten pitäisi olla paljon alttiimpia kuin bakteerit Cl=2-hyökkäykselle.

Kaikki nämä tosiasiat viittaavat siihen, että kun ClO2 joutuu kosketuksiin viruksen pinnan kanssa, sen inaktivoituminen on nopeaa. Virus, joka on valmis infektoimaan solun, on kuitenkin tyypillisesti vesifaasissa, esim. nestepisarassa tai limakalvoja peittävässä epiteelin kalvossa. Näiden vesifaasien koko on paljon suurempi kuin viruksen koko. Siksi tällaisissa tapauksissa nopeutta rajoittava vaihe on todennäköisesti ClO2:n diffuusio veteen ja reaktio muiden aineiden kanssa. Itse viruksen inaktivoimiseen tarvittava aika olisi lyhyt verrattuna aikaan, joka tarvitaan riittävän ClO2-molekyylien kuljettamiseen virukseen.

Ehdotuksia virusinfektioiden leviämisen estämiseksi ClO2 :lla

Aiempien väitteiden perusteella nyt esitetään joitakin ehdotuksia siitä, kuinka vesipitoisia ClO2-liuoksia voitaisiin soveltaa globaaleihin ja paikallisiin (henkilökohtaisiin) desinfiointitarkoituksiin. Monet näistä ehdotuksista perustuvat hypoteeseihin, ja siksi niitä voidaan soveltaa vasta huolellisen tutkimuksen jälkeen. Tämän työn tavoitteena on käynnistää tutkimus näiden hypoteesien ja ehdotusten tarkistamiseksi kokeellisesti, mikä voisi johtaa uusiin erittäin puhtaiden ClO2-liuosten sovelluksiin virus- tai muita infektioita vastaan. Nämä ideat saattavat kypsyä edelleen ajan myötä, mutta globaalin pandemian uhan vuoksi olemme päättäneet edetä nopeasti.

Globaali ehkäisy

Ilmatilojen, kovien pintojen ja ihmisten desinfiointi samanaikaisesti vesipitoisilla ClO2-liuoksilla. Ehdotamme tässä pohjimmiltaan samaa ajatusta, jota Ogata et al. ovat jo ehdottaneet. [21, 24, 25]: on mahdollista luoda ClO2-ilmakehää, joka voi olla ihmiselle turvallista, mutta samalla haitallista mikrobeille. Heidän ehdotustensa ja meidän ehdotustensa välillä on kuitenkin eroja. Ogatan ryhmä piti ilmakehän ClO2-pitoisuutta (C) ainoana tärkeänä hoidon parametrina. He ehdottivat, että ClO2-konsentraatiota käytettäisiin alle 0,1 ppm (V/V) OSHA-rajan ajaksi, joka on tarpeen mikrobien inaktivoimiseksi. Tällaisella menetelmällä tarvittava kosketusaika (T) voi kuitenkin olla hyvin pitkä. Tässä suosittelemme käyttämään CT-tuotetta desinfiointiparametrina. Tällä tavalla on mahdollista levittää ClO:ta2 pitoisuutta yli OSHA-rajan, mutta vain rajoitetun ajan. Tämän menetelmän etuna on, että kun käytetään korkeampia C-arvoja, tarvittavat kosketusajat voivat olla paljon lyhyempiä. Ideaa havainnollistaa alla oleva numeerinen esimerkki.

Toinen tärkeä ero on, että Ogatan menetelmä keskittyy enimmäkseen ClO2 -kaasun rooliin, kun taas korostamme ClO2- ja H2O -kaasujen samanaikaisen käytön tärkeyttä, kuten Morino et al.:n havainnot vahvistavat. [16]. Tätä tarkoitusta varten ehdotamme uutta tapaa luoda ClO2-ilmakehä: levittää vesipitoisia ClO2-liuoksia, jotka voivat saada aikaan ClO2- ja H2O -tasapainopitoisuudet ilmakehässä, kun niitä suihkutetaan ilmaan. Vesiliuoksia on myös helpompi käsitellä kuin ylläpitää vakaita ja erittäin alhaisia ClO2-tasoja jatkuvissa kaasuvirroissa.

On suositeltavaa käyttää erittäin puhtaita ClO2-liuoksia ruiskutukseen, jotta vältetään ei-toivotut sivuvaikutukset henkilöille tai käsitellyille pinnoille. Erittäin puhtaat ClO2-liuokset haihtuvat ilman jäämiä tai jälkiä.

Havainnollistava numeerinen esimerkki

Oletetaan, että halutaan desinfioida suljettu tila ruiskuttamalla siihen ClO2-varastoliuosta. ClO2-tasapainopitoisuus c ilmassa kaasussa ja c w,e nestefaasissa voidaan laskea Ishin mittaamasta höyry-neste-tasapainojakaumasta [11]:

Tämä tulos on hieman alle OSHA STEL (Short Term Exposition Limit) -arvon, joka on 0,30 ppm (V/V) 15 minuutin ajan. OSHA:n mukaan STEL on hyväksyttävä keskialtistuminen lyhyellä aikavälillä – yleensä 15 min – niin kauan kuin aikapainotettua keskiarvoa (TWA) ei ylitetä. Jos henkilö altistuu 0,30 ppm:lle 15 minuutin ajan ja heti sen jälkeen hän oleskelee ClO2-vapaassa ilmakehässä 30 minuuttia, niin koko tämän 45 minuutin TWA-arvo on vain hyväksyttävä 0,10 ppm. Kaikki tämä tarkoittaa, että henkilön altistuminen 0,30 ppm ClO2-ilmakehään 15 minuutin ajan yhdellä kertaa tai jopa tämän hoidon määräajoin 30 minuutin tauoilla 8 tunnin aikana ei saisi aiheuttaa terveysongelmia.

Kysymyksiä ja huomautuksia

1. On tärkeä kysymys, riittääkö 15 minuutin oleskelu 0,29 ppm (V/V) ClO2-ilmakehässä inaktivoimaan läsnä olevat virukset? Kostean ilmakehän osalta voidaan olettaa, että virukset ovat myös märkiä, tai jopa niitä löytyy pienistä vesipisaroista, jotka sisältävät 0,025 ppm (m/m) ClO2:ta . Meillä ei ole suoria tietoja virusten inaktivoitumisajasta tällaisessa liuoksessa, mutta meillä on arviolta 15 ± 5 s tappamisaika E. coli-bakteerille 0,25 ppm (m/m) ClO2-liuoksessa [2].On perusteltua olettaa, että tappoaika olisi 10 kertaa pidempi 10 kertaa laimeammassa liuoksessa, eli 150 s = 2,5 min. Koska virukset todennäköisesti inaktivoituvat nopeammin kuin bakteerit ja 15 minuuttia on kuusi kertaa pidempi kuin arvioitu 2,5 minuuttia E. colille, tällainen menetelmä voi olla onnistunut, ainakin teoriassa.

2. Tällaisen menetelmän testaamiseksi suosittelemme rakentamaan erityisiä desinfiointihuoneita, joissa on suurempi tilavuus. Tällaisten kokeiden aloittaminen olisi erittäin toivottavaa, koska tämä menetelmä voisi olla tehokas epäspesifinen puolustus kaikentyyppisiä viruksia vastaan ja auttaa hillitsemään virusepidemiaa.

Paikallinen ehkäisy. Henkilökohtaiset desinfiointitekniikat virusinfektioita vastaan.

Suun ja ylempien hengitysteiden desinfiointi garglingilla.

Nykyinen epidemia-koronavirus tunnetaan suussa ja sekä ylemmissä että alemmissa hengitysteissä, mutta aiheuttaa vakavia infektioita vain alahengitysteihin, erityisesti keuhkoihin. Taudin itämisaika on useita päiviä, mutta virus voidaan usein havaita ylemmistä hengitysteistä otetuista näytteistä muutama päivä ennen oireiden ilmaantumista. Kuten edellisessä luvussa todettiin, klooridioksidi varmasti inaktivoi viruksen. Kurlaamalla pääsee käsiksi ylempiin hengitysteihin nenäonteloa lukuun ottamatta, mutta sinne pääsee myös esim. nenätipoilla tai klooridioksidilla kyllästetyillä tamponeilla. Nämä osat voidaan desinfioida huuhtelemalla ne säännöllisesti kaupallisesti saatavilla erittäin puhtailla klooridioksidiliuoksilla [31], jolloin virusten lukumäärää voidaan vähentää merkittävästi suussa ja ylemmissä hengitysteissä. Varmoja emme voi olla, että tällainen hoito riittäisi estämään taudin kehittymistä, sillä muissa kehon osissa elävät virukset voivat selviytyä. Kuitenkin osan viruksista inaktivointi tällaisella hoidolla auttaa varmasti immuunijärjestelmää taistelemaan tautia vastaan. Tässä suhteessa on mielenkiintoista huomata, että japanilaiset tutkijat ovat osoittaneet [26], että säännöllinen kurlaus juomavedellä on vähentänyt ylähengitystieinfektioiden ilmaantuvuutta tilastollisesti merkitsevästi. Vaikutus selittyy sillä, että kokeissa käytetty juomavesi sisälsi 0,5 mg/l klooria, jota käytettiin veden desinfiointiin. Huomautamme tässä, että joissain paikoissa juomaveden desinfiointiin käytetään klooridioksidia kloorin sijaan.

Alempien hengitysteiden desinfiointi

Ensimmäinen ongelma on se, kuinka ClO2 voidaan viedä turvallisesti alempiin hengitysteihin. Tätä tarkoitusta varten mitä tahansa inhalaatiotekniikkaa voitaisiin käyttää käyttämällä ClO2:ta sisältävien vesipisaroiden aerosoleja [14].

Toinen ja tärkeämpi ongelma on se, kuinka paljon ClO2:ta voidaan hengittää keuhkoja vahingoittamatta? Olisi hyödyllistä tietää se ClO2-annos , joka ei ole vielä haitallinen keuhkoille. Tietojemme mukaan tällaisia suoria tietoja ei ole saatavilla kirjallisuudesta, mutta ne voidaan laskea muista tiedoista. Tällaisen laskennan lähtökohtana on OSHA STEL -arvo [30], jonka mukaan 0,30 ppm ClO2:ta työpaikan ilmakehässä on siedettävä 15 minuutin ajan ilman vaurioita. Työntekijän 15 minuutin aikana hengittämän ilman tilavuus on 15 kertaa niin sanottu "minuuttitilavuusventilaatio" [32]. Viitteen taulukon 3 mukaan. [32], kevyen toiminnan aikana esim. autossa istuessa minuuttitilavuus on noin 12 l, joten sisäänhengitetyn ilman kokonaismäärä on noin 180 l. 0,30 ppm:n pitoisuudella sisäänhengitetyn ClO2:n kokonaismäärä on 54 µL, mikä on (20 °C:ssa) 2,25 umol ≈ 0,15 mg C102. Jos oletetaan, että aktiivisuus on voimakkaampaa, se voi olla kaksi kertaa enemmän, 0,30 mg. Tämä karkea laskelma osoittaa, että suunnilleen tämä on ClO2:n määrä , jonka keuhkot sietävät. OSHA-raja sovelsi todennäköisesti korkeita turvallisuustekijöitä, joten todellisen rajan pitäisi olla korkeampi.

Suosittelemme, että eläinkokeita tulisi suorittaa kokeellisten arvojen saamiseksi ClO2:n keuhkotoksisuudesta . Lisäksi olisi tärkeää tarkistaa lisäeläinkokeissa, pystyykö myrkyttömänä määränä käytetty ClO2 hoitamaan bakteerien tai virusten aiheuttamia keuhkoinfektioita.

Johtopäätös

Tässä pääkirjoituksessa teimme yhteenvedon klooridioksidin ainutlaatuisista ominaisuuksista, jotka tekevät siitä ihanteellisen ja epäspesifisen antimikrobisen aineen ihmiselle vaarattomina pitoisuuksina, ja tarkastelimme aiempia tutkimuksia virusinfektioiden ehkäisystä kaasumaisella ClO2:lla . Tämän taustan perusteella ehdotimme uusia hypoteettisia menetelmiä, joissa käytetään klooridioksidia huoneiden desinfiointiin, ihmisten tartunnan estämiseen ja viruksen leviämisen hidastamiseen. Nämä ovat epäspesifisiä menetelmiä, joita voidaan käyttää mitä tahansa uutta löydettyä virusta vastaan ensimmäisenä suojana, kunnes tehokkaita erityisiä vastatoimia kehitetään.

Eturistiriita

Zoltán Noszticzius, Maria Wittmann ja Kristóf Kály-Kullai ovat eurooppapatentin 2069232 "Permeaatiomenetelmä ja -laitteisto erittäin puhdasta klooridioksidia sisältävien nesteidenvalmistamiseksi" yhteiskeksijöitä. Zoltán Noszticzius on Solumium Ltd:n (klooridioksidia valmistavan yrityksen) perustaja ja omistaja, kun taas Kristóf Kály-Kullai on sen palkattu työntekijä.

Viitteet

• 1. ↑Bastacky J, Lee CY, Goerke J, Koushafar H, Yager D, Kenaga L,et ai. Alveolaarinen vuorauskerros on ohut ja jatkuva: matalan lämpötilan pyyhkäisyelektronimikroskooppi rotan keuhkoista. J Appl Physiol1995; 79(5):1615-28,https://doi.org/10.1152/jappl.1995.79.5.1615._

2. ↑ Benarde MA, Snow WB, Oliveri VP, Davidson B. Klooridioksidilla tapahtuvan bakteerien desinfioinnin kinetiikka ja mekanismi. Appl Microbiol1967; 15(2):257-65.

• 3. ↑ Cantin AM, North SL, Hubbard RC, Crystal RG. Normaali keuhkorakkuloiden epiteelin vuorausneste sisältää suuria määriä glutationia. J Appl Physiol1987; 63(1):152-7,https://doi.org/10.1152/jappl.1987.63.1.152._

• 4. ↑ Cao Z, Zhang Q, Lu X, Pfeiffer D, Jia Z, Song H,et ai. Arvioimme 2019-nCoV:n tehokkaan lisääntymisluvun Kiinassa. Saatavilla verkossa osoitteessahttp.medxriv.org; 29. tammikuuta; 2020; https://doi.org/10.1101/2020.01.27.20018952.

• 5. ↑Cross CE, van der Vliet A, O'Neill CA, Louie S, Halliwell B. Hapettimet, antioksidantit ja hengitysteiden vuorauksen nesteet. Environ Health Perspect1994; 102(Suppl.10):185-91,https://doi.org/10.1289/ehp.94102s10185.

• 6. ↑ EPA:n opas yleisten vesilähteiden suodatus- ja desinfiointivaatimusten noudattamiseksi (AWWA; 1991). Taulukko C-9: CT-arvot virusten inaktivoinnille klooridioksidilla. Saatavilla osoitteessa http://www.opssys.com/InstantKB/article.aspx?id=14495.

• 7. ↑ Forman HJ, Zhang H, Rinna A. Glutationi: katsaus sen suojaaviin rooleihin, mittaukseen ja biosynteesiin. Mol Aspects Med2009; 30(1–2):1–12, https://doi.org/10.1016/j.mam.2008.08.006._

• 8. ↑ Hauchman FS, Noss CI, Olivieri VP. Klooridioksidin reaktiivisuus nukleiinihappojen kanssa. Water Res1986; 20(3):357–61,https://doi.org/10.1016/0043-1354(86)90083-7.

• 9. ↑ https://www.britannica.com/science/coronavirus-virus-group.

• 10. ↑ Hui DS, Azhar EI, Madani TA, Ntoumi F, Kock R, Dar O et ai. Uusien koronavirusten jatkuva 2019-nCoV-epidemiauhka maailmanlaajuiselle terveydelle – Viimeisin vuoden 2019 uusi koronavirusepidemia Wuhanissa, Kiinassa. Int J Infect Dis2020; 91:264-6, https://doi.org/10.1016/j.ijid.2020.01.009.

• 11. ↑ Ishi G. Klooridioksidin liukoisuus. Chem Eng Japan1958; 22(3):153-4,https://doi.org/10.1252/kakoronbunshu1953.22.153.

• 12. ↑ Ison A, Odeh IN, Margerum DW. Kysteiinin ja glutationin klooridioksidin ja kloriitin hapettumisen kinetiikka ja mekanismit. Inorg Chem2006; 45:8768-75, https://doi.org/10.1021/ic0609554.

 

• 13. Knudsen L, Ochs M. Keuhkojen alveolien mikromekaniikka: pinta-aktiivisten aineiden ja kudoskomponenttien rakenne ja toiminta. Katsaus Histochem Cell Biol2018; 150:661-76, https://doi.org/10.1007/s00418-018-1747-9.

• 14. ↑ Koren E. Ehdotus. Henkilötiedot; 2020.

• 15. ↑ Lubbers JR, Chauan SR, Bianchine JR. Klooridioksidin, kloriitin ja kloraatin kontrolloidut kliiniset arvioinnit ihmisellä. Environ Health Perspect1982; 46:57-62, https://doi.org/10.1289/ehp.824657.

• 16. ↑ Morino H, Fukuda T, Miura T, Lee C, Shibata T, Sanekata T. Kissan kalikiviruksen, Noroviruksen korvikkeen, inaktivointi klooridioksidikaasulla. Biocontrol Sci2009; 14:147-53, https://doi.org/10.4265/bio.14.147.

• 17. ↑ Napolitano MJ, Green BJ, Nicoson JS, Margerum DW. Tyrosiinin, N-asetyylityrosiinin ja Dopan klooridioksidihapetukset. Chem Res Toxicol2005; 18:501-8, https://doi.org/10.1021/tx049697i.

• 18. ↑ Napolitano MJ, Stewart DJ, Margerum DW. Guanosiini-5′-monofosfaatin klooridioksidihapetus. Chem Res Toxicol2006; 19:1451-8, https://doi.org/10.1021/tx060124a.

• 19. ↑ Noss CI, Hauchman FS, Olivieri VP. Klooridioksidin reaktiivisuus proteiinien kanssa. Water Res. 1986; 20(3):351-356, https://doi.org/10.1016/0043-1354(86)90083-7.

• 20. ↑ Noszticzius Z, Wittmann M, Kály-Kullai K, Beregvári Z, Kiss I, Rosivall L ,et ai. Klooridioksidi on kokoselektiivinen antimikrobinen aine. PloS One2013; 8(11):e79157, https://doi.org/10.1371/journal.pone.0079157.

• 21. ↑ Ogata N. Klooridioksidikaasu käytettäväksi hengitysteiden virusinfektioiden hoidossa. Eurooppapatenttispesifikaatio EP 1955719 B1. Etusija JP 2005342503; 2005.

• 22. ↑ Ogata N. Proteiinin denaturaatio klooridioksidilla: tryptofaani- ja tyrosiinijäämien oksidatiivinen modifikaatio. Biokemia2007; 46:4898-911, https://doi.org/10.1021/bi061827u.

• 23. ↑ Ogata N. Influenssaviruksen hemagglutiniinin inaktivointi klooridioksidilla: konservoituneen tryptofaani 153 -tähteen hapettuminen reseptoria sitovassa kohdassa. J Gen Virol2012; 93:2558-63, https://doi.org/10.1099/vir.0.044263-0.

• 24. Ogata N, Shibata T. Erittäin alhaisen pitoisuuden klooridioksidikaasun vaikutus koululaisten poissaoloon. Int J Med Med Sci 2009; 1(7):288-9.

• 25. Ogata N, Shibita T. Pienipitoisen klooridioksidikaasun suojaava vaikutus influenssa A-virusinfektiota vastaan. J Gen Virol2008; 89:60-7,

• 26. Satomura K, Kitamura T, Kawamura T, Shimbo T, Watanabe M, Kamei M, et ai. Suuret kylmätutkijat: ylähengitysinfektioiden ehkäisy kurlaamalla. Satunnaistettu koe. Am J PrevMed2005;29:302-7,

• • 27. Stewart DJ, Napolitano MJ, Bakhmutova-Albert EV, Margerum DW. Tryptofaanin klooridioksidihapetuksen kinetiikka ja mekanismit. Inorg Cham2008; 47:1639-47,

  • 28. Tan H, Wheeler BW, Wei C. Klooridioksidin reaktio aminohappojen ja peptidien kanssa: kinetiikka ja mutageenisuustutkimukset. Mutat Res1987; 188(4):259-66,

  • 29. Tao mT, Queen K, Paden CR, Zhang J, Li Y, Uehara A, et ai. Vaikea akuutti hengitystieoireyhtymä koronavirus 2-isolaatti 2019-nCov/USA-IL1/2020, täydellinen genomi. NCBI GenBank; 2020. Saatavilla osoitteessa

  • 30. Yhdysvaltain työturvallisuus- ja työterveyshuolto. Klooridioksidin määritys työpaikan ilmassa; 1991. Saatavilla osoitteessa

  • 31. www.solumium.com

  • 32. Zuurbier M, Hoek G, den Hazel P, Brunekreef B. Pyöräilijöiden, auto- ja linja-automatkustajien minuuttituuletus: kokeellinen tutkimus. Ympäristöterveys 2009; 8:48,